Резюме

В статье представлены результаты изучения влияния мази «Стизамет»^® на заживление ожоговых ран в стандартных условиях у крыс.

Цель ‒ изучить влияние мази «Стизамет»^® на заживление ожоговых ран у крыс в стандартных условиях.

Материалы и методы. Исследование проводили на 40 крысах-самцах линии Wistar массой 110‒120 г. Для создания модели ожоговой раны использовали медный куб площадью основания 4 см². Куб нагревали в кипящей воде и прикладывали к депилированному участку кожи межлопаточной области спины наркотизированных животных, вызывая ожог II степени. Со следующего дня (кроме крыс интактной группы) животным наносили основу или мазь «Стизамет»^® до полного заживления раны у животных последней группы, при этом учитывали размер раны. В гистологических препаратах подсчитывали толщину клеточного эпидермиса.

Результаты и вывод: c 9-го дня эксперимента мазь «Стизамет»^® стимулировала заживление ожоговых ран у крыс.

Ключевые слова: крысы, ожоговые раны, мазь «Стизамет»^®

Введение

Мазь «Стизамет»^® была зарегистрирована в качестве лекарственного средства в 2005 г. К этому времени был написан обзор литературы [1], изучены ее дерматотропная активность [2], фармакокинетика [3], безвредность [4], накоплен опыт применения мази в дерматологии [5] и хирургии [6]. Лечение ожогов II степени давало положительный результат на 8‒10-й дни после 3-кратной смены повязок. Однако у большинства пациентов (с ожогами III степени) терапевтическое действие препарата затягивалось до 28‒30 суток. Терапевтический эффект длительно незаживающих ран оказался малоэффективным. В целом, терапия была на 1‒2 дня короче в сравнении с традиционным курсом [7]. Проведенное позже поисковое исследование на крысах показало, что мазь «Стизамет»^® в сравнении с другими композициями оказывает большее ранозаживляющее действие на ожоговые раны [8].

Целью настоящего исследования стало изучение влияния мази «Стизамет»^® на заживление ожоговых ран у крыс в стандартных условиях.

Материалы и методы

Исследование проведено на 40 крысах-самцах линии Wistar массой 110‒120 г, полученных из питомника «Андреевка» филиала ФГБУН «МЦБ МТ» ФМБА России. Дополнительно 2 крысы были отправлены в лабораторию на предмет инфицирования. Правила содержания и ухода за животными выполнялись в соответствии с СОП АО «Ретиноиды». Замену клеток с подстилом и бутылками с водой производили 1 раз в 2 дня, влажную уборку – ежедневно. В качестве подстила использовали древесную стружку, полученную от ООО «Лабораторкорм» (Россия). Животные находились в карантине 14 суток в помещении с контролируемыми условиями окружающей среды по 8 крыс в поликарбонатных клетках. Крысы в группы подбирались случайным образом и, как и клетки, были промаркированы. Корм (поставщик ‒ «Лабораторкорм», Россия) соответствовал ГОСТ 55453-2013. Вода для питья проходила фильтрационную очистку. Корм и воду давали ad libitum. При поступлении животных осматривал ветеринарный врач. Больных крыс выбраковывали. Сведения о составе мазевой основы и мази «Стизамет»^® представлены в табл. 1.

Мазевая основа и мазь «Стизамет»^® были упакованы в стандартные алюминиевые тубы с внутренним лаковым покрытием (ТУ 9467‒001‒10010399‒2013) по 35 г, промаркированы и переданы для проведения эксперимента. Все манипуляции по получению, хранению, выдаче, учету, подготовке доз и уничтожению остатков основы и мази «Стизамет»^® выполнялись в соответствии с СОП Центра доклинических исследований АО «Ретиноиды». Неиспользованные остатки мазевой основы и мази «Стизамет»^® утилизировались. Предварительно крыс вводили в золетиловый наркоз (Вирбак, Франция) [10]. К депилированной коже межлопаточной области спины крысы прикладывали куб, выдержанный в кипящей воде, на 10 сек. [8], что вызывало ожог II степени (разрушение эпидермиса, умеренный отек дермы, слабый отек гиподермы). Со следующего дня (кроме крыс интактной группы) животным наносили мазевую основу или мазь «Стизамет»^® до полного заживления раны у всех крыс группы. Навески препарата «Стизамет»^® в количестве 0,05 г отвешивали на электронных весах АХ 120 (Япония). О заживлении судили по изменению среднего полудиаметра раны. По окончании эксперимента животных подвергли эвтаназии на установке АЕ 904 000 (Россия). Кожу из мест нанесения мазевой основы или мази «Стизамет»^® готовили к гистологическому исследованию по традиционной методике [11]. Для подсчета толщины клеточного эпидермиса использовали микроскоп Аксиостар-плюс, оснащенный цифровым комплексом «Микромед-2-1600-3» (Германия) и программным обеспечением «Диаморф» (Россия). Материалы обрабатывали статистически [9]. Письменный план 004/20 БЭК утвержден 28.05.2020.

Результаты

Из представленных сведений (рис. и табл. 2) можно видеть, что с 9-го дня и до конца эксперимента достоверно возрастало различие в заживлении ожоговых ран у крыс, получивших местно мазь «Стизамет»^®. При этом толщина клеточного эпидермиса также возрастала (табл. 3).

Рис. Динамика средних значений полудиаметра ожоговой раны у крыс линии Wistar, получавших местно мазь «Стизамет»^®, в сравнении с такими же крысами, получавшими мазевую основу (в сантиметрах)

Обсуждение

Проведенное исследование показало, что ожоговые раны кожи в стандартных условиях у крыс линии Wistar заживают быстрее, чем у аналогичных животных, получавших мазевую основу. Это отражено в графическом, статистическом и морфометрическом исследованиях. Замена мази «Стизамет»^® на мазь Левомиколь небезупречна, т. к. эта мазь содержит помимо метилурацила левомицетин, неприменяемый для получения «косметического» рубца.

Вывод

Заживление ожоговой раны у крыс линии Wistar после местного применения мази «Стизамет»^® начиналось с 9-го дня и завершалось к 41-му дню эксперимента, опережая таковое у животных контрольных групп.

Литература

1. Белоусова Т.А. Фармакологические свойства метилурацила (обзор литературы) // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 11‒43.
2. Яцковский А.Н., Белоусова Т.А., Жучков С.А. и др. Дерматотропная активность мази Стизамет^® // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 43‒51.
3. Ноздрин В.И., Гузев К.С., Архапчев Ю.П. Фармакокинетика метилурацила после аппликаций содержащих его мазей // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 51‒57.
4. Ноздрин В.И., Яцковский А.Н., Белоусова Т.А. и др. Изучение безвредности препарата Стизамет^® // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 57‒61.
5. Альбанова В.И. Опыт применения мази Стизамет^® в лечении аллергодерматозов и псориаза // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 61‒68.
6. Крастин О.А., Светухин А.М., Блатун Л.А. и др. Эффективность препарата Стизамет^® при лечении ран мягких тканей // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 71‒76.
7. Смирнов С.В., Логинов Л.П., Шахламов М.В. Результаты клинического изучения мази Стизамет^® при ожогах // Альманах «Ретиноиды». 2009. Вып. 28. С. 68‒71.
8. Ноздрин К.В., Крот С.Л., Бородин В.В. и др. Влияние смеси ГЛС (ретинола пальмитат + метилурацил + декспантенол + хлоргексидина биглюконат) на ожоговые раны у крыс // Альманах «Ретиноиды». 2021. Вып. 36. С. 59‒64.
9. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. С. 51‒63.
10. Вавилова В.А., Щекунова Е.В., Кашкин В.А. и др. Апробация метода оценки фототоксических эффектов лекарственных препаратов в условиях in vivo // Ведомости НЦ экспертизы средств медицинского применения. Т. 218. Вып. 2. С. 115‒122.