К.Н. Пустовая1, Н.И. Аванесова1, Ю.М. Жук2, М.М. Сморчков3, В.И. Ноздрин1
1 АО «Ретиноиды», Москва, Россия;
2 ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», Москва, Россия;
3 ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова» Минздрава России, Москва, Россия;
Актуальность работы обусловлена недостаточной изученностью морфологии клещей рода Demodex и их локализации в волосяных фолликулах и сальных железах различных участков кожи.
Цель исследования ‒ изучение внешнего вида клещей Demodex и локализации их в структурах сально-волосяного комплекса человека методами сканирующей электронной и световой микроскопии.
Материалы и методы. Внешний вид взрослых особей клещей Demodex изучены методом сканирующей электронной микроскопии с компьютерной цветокоррекцией в содержимом соскобов сально-волосяных комплексов от 5 здоровых мужчин-добровольцев в возрасте 30–40 лет. Локализация клещей в сально-волосяных комплексах исследована методом световой микроскопии на биоптатах кожи носогубной области 33 мужчин в возрасте 26–74 лет, погибших вследствие различных заболеваний или травм. Панч-биопсию проводили через 12–15 ч после смерти, полученный материал окрашивали по Ван Гизону и Маллори.
Результаты. Полученные с помощью сканирующей электронной микроскопии данные о внешнем виде и основных структурах клещей Demodex подтверждают и дополняют описанные в литературе особенности их морфологии. При исследовании локализации паразитов методом световой микроскопии остатки клещей выявлены в устье волосяного влагалища фолликулов, их просвете, толще эпителиальной выстилки, а также в выводных протоках сальных желез и среди себоцитов.
Заключение. Результаты, полученные на биопсийном материале с использованием сканирующей и световой микроскопии, представляют интерес для исследовательских групп, занимающихся разработкой и изучением фармакологического действия противопаразитарных препаратов.
Ключевые слова: клещи Demodex, внешний вид, локализация в сально-волосяных фолликулах, кожа человека, сканирующая электронная микроскопия, световая микроскопия.
Род клещей Demodex насчитывает около 65 видов паразитов. Они являются видоспецифичными, например, для собак характерны D. canis, для кошек — D. cati, для коров — D. bovis и др. На человеке могут обитать D. folliculorum, D. brevis и D. canis [1]. Морфология клещей характеризуется некоторыми особенностями. Длина самок составляет около 0,40 мм, самцов — 0,16 мм, тело паразитов покрыто хитиновой оболочкой [2]. У взрослых особей выделяют головной отдел, грудь и брюшко [3]. На груди локализуются 4 пары сегментированных ножек, заканчивающихся крючьями. У Demodex круглое ротовое отверстие и колющие хелицеры. Пищеварительная система редуцирована и состоит из хелицер и слаборазвитого просвета среднего кармана без задней кишки и ануса [4, 5].
В развитии Demodex проходит 5 стадий: яйцо, личинка, протонимфа, дейтонимфа и имаго. Через 60 ч после отложения самкой яиц из них образуются личинки, которые, питаясь остатками клеток эпидермиса и кожным салом, в течение 40 ч превращаются в неподвижную протонимфу. Через 72 ч в кожных покровах можно обнаружить подвижную дейтонимфу, а еще через 60 ч — половозрелую особь (имаго), которая живет 14 дней, затем откладывает яйца и погибает [6].
Морфология клещей рода Demodex и локализация их в волосяных фолликулах и сальных железах различных участков кожи изучены недостаточно. Углубленное изучение биологии клещей Demodex является важным для понимания фармакологического действия препаратов.
Цель исследования — изучение внешнего вида клещей Demodex и их локализации в структурах сально-волосяного комплекса человека методами сканирующей электронной и световой микроскопии.
Внешний вид клеща Demodex изучен на материале, полученном от 5 здоровых мужчин-добровольцев в возрасте от 30 до 40 лет. Для этого с помощью скальпеля с кожи лица проводили соскоб содержимого сально-волосяных комплексов. Под микроскопом выделяли взрослых особей клещей и обездвиживали в 10% растворе NaOH, обезвоживали в 70 и 96% растворе спирта. После этого фиксировали в спиртовом растворе Камфена восходящей концентрации. Материалы исследовали методом сканирующей электронной микроскопии с компьютерной цветокоррекцией на аппарате Hitachi S-3400N (Япония).
Для изучения локализации паразитов в коже исследование проводили на биоптатах 33 мужчин в возрасте от 26 до 74 лет, причиной смерти которых являлись острая сердечная недостаточность в сочетании с атеросклеротической болезнью сердца или кардиомиопатией, острое отравление алкоголем или наркотическими веществами, пневмония и травмы, несовместимые с жизнью. Взятие материала с кожи носогубной складки (столбик тканей размером 8 мм) осуществляли через 12–15 ч после смерти методом панч-биопсии. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине. Срезы получали по стандартной методике и окрашивали по методам Ван Гизона и Маллори. Для просмотра материала использовали микроскоп Axioskop 2, камеру AxioCam и программное обеспечение AxioVision («Carl Zeiss», Германия).
При изучении внешнего вида клещей Demodex с помощью метода сканирующей электронной микроскопии получены четкие изображения основных частей тела взрослых особей (имаго): головного и грудного отделов, ротового аппарата и конечностей (рис. 1).
Рис 1. Микрофотографии клеща Demodex на стадии имаго, полученные методом сканирующей электронной микроскопии с последующей цветокоррекцией (аппарат Hitachi S-3400N; ×750, ×1900).
а: 1 — брюшко (опистосома), 2 — грудь (подосома), 3 — головной конец (гнатосома); б: 4 — конечности, 5 — ротовой аппарат.
При исследовании мест локализации паразитов в структурах сально-волосяных комплексов методом световой микроскопии остатки клещей найдены в устье волосяного влагалища фолликулов, их просвете, толще эпителиальной выстилки, а также в выводных протоках сальных желез и среди себоцитов (рис. 2–4).
Рис 2. Локализация клещей Demodex (в овалах) в структурах сально-волосяного комплекса (окраска по Ван Гизону; ×100, ×200).
а — в устье волосяного влагалища, б — в дольке сальной железы, в — в толще эпителия сально-волосяного комплекса.
Рис 3. Локализация клещей Demodex (в овалах) в структурах сально-волосяного комплекса (окраска по Маллори; ×100).
а — в выводном протоке сальной железы, б — в дольке сальной железы, в — в толще эпителия волосяного влагалища.
Рис 4. Схема локализации клещей Demodex в сально-волосяном комплексе.
Результаты, полученные на биопсийном материале с использованием сканирующей и световой микроскопии, подтверждают и дополняют имеющиеся в литературе сведения об особенностях морфологии и локализации клещей Demodex in vivo [5, 7—10] и представляют интерес для исследовательских групп, занимающихся разработкой и изучением фармакологического действия противопаразитарных препаратов.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Жук Ю.М. являлась сотрудником ГБУЗ Москвы «Бюро судебно-медицинской экспертизы Департамента здравоохранения Москвы» с 2007 г. по 2016 г. Остальные авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Работа утверждена Комиссией по этике АО «Ретиноиды» (протокол №1 от 28.08.20).
Не забудьте вступить в наши группы в социальных сетях!